实验正式开始

江河今日，提前下班。

医院这边的子弹，且让它先飞一会儿。

回学校推进科研项目去。

重症急性胰腺炎的论文已经发出，接下来的重头戏，是irna早筛。

这玩意做出来，是真正能撼动全世界的核武器，更是他前世今生执念的所在：

——攻克胰腺癌，从极早期的精准筛查开始。

返回南医大的公交车，江河在项目组的qq群里发了一条消息。

“所有人，一小时后，实验室开会。”

实验室。

江河进去的时候，众人都乖巧坐着。

“老大。”易向晚道，“你不是上班么？怎么这会儿就回来了？没有迎新聚餐什么的？”

“聚餐没有，倒是给我排了十五张重症床位。”

“啊，十五张？附一院现在把新人当牲口使啊？”

“没事，不用管医院那边，今天喊你们过来，是因为我们前期收集的几百份冻存血清样本已经全部到位了，irna早筛项目，从今天开始，正式进入湿实验阶段。”

此话一出，几个人的神色瞬间变得严肃。

跟江河混了这么久，他们很清楚这个项目的分量。

江河从包里拿出一沓打印好的a4纸，分发给众人。

“这是我这两天做出来的实验方案，大家先看一看。”

众人接过方案，低头翻阅。

江河：“这个项目的前景有多大，我以前跟你们说过，但我今天必须给你们打个预防针，这个过程，会极其枯燥，且充满挫折。”

“简单来说，我们要在血液里，找到与肿瘤相关的irna，目前，针对血清irna的商业化提取试剂盒还不够成熟，我们只能用最基础的方法来做。”

江河站起身，走到白板前，拿起马克笔画了一个简单的流程图。

“第一步，rna提取，这是最耗时的一步，也是你们未来几个月每天都要重复的工作。”

“我们手头有近六百份血清样本，我要求你们使用trizol ls试剂法来进行提取，因为血清中本身存在大量的rnase（核糖核酸酶），如果不迅速裂解，我们的目标rna就会降解得一干二净。”

“记住几个核心要点。”

“第一，绝对的无酶环境，我们的枪头、ep管必须是去rna酶处理过的，台面每天实验前用rnasezap喷洒后，再用depc水擦拭。”

“第二，加氯仿后的相分离，离心完，吸取上层水相的时候，手千万不要抖，哪怕少吸一点水相，也绝不能吸到中间的白色蛋白层，一旦污染，后面的数据全废。”

唐培认真地在方案上做着笔记：“老大，提取完之后呢？”

“提取完之后，是逆转录（rt）和实时荧光定量pcr（qpcr）。”

江河写下了一个数学公式。

“这是相对定量的计算公式，但因为irna太短了，只有大约22个核苷酸，传统的随机引物根本无法对其进行逆转录，所以，我们需要在逆转录之前，进行poly(a)加尾，或者使用特异性的茎环（ste-loop）引物。”

“现阶段，我们用最基础的加尾法，这些长周期、重复性的基础提取和建库工作，我今天全部分配下去，两人一组，轮班倒，一个月内，我要看到这六百份样本的cdna文库全部建立完毕，听明白了吗？”

顾亦舟严肃点头：“没问题老大，交给我们。”

江河看着手里的实验方案，突然想到副院长张随。

张随是美国约翰·霍普金斯大学医学院的博士后。

在08年，全球范围内在irna循环标志物领域走得最前沿的，除了哈佛的几家附属医院，就是约翰·霍普金斯的肿瘤学团队。

他们是江河这个项目在国际上最大的竞争对手。

想要在国际顶刊上抢发标准，光有数据有时候是不够的。

如果能借用张随在霍普金斯大学的人脉网络，比如让他作为通讯作者之一与国外同行进行学术沟通。

这篇文章在投向《柳叶刀·肿瘤学》或者《新英格兰医学杂志》时，面临的阻力会小得多。

不过，这些都是后话。

打铁还需自身硬，先把数据跑出来再说。

江河收回思绪。

“好了，戴上手套，我现在带你们做第一批样本的提取演示，所有人盯紧我的操作细节。”

接下来的两个小时，实验室里热火朝天。

江老师事无巨细，教学非常认真。

加入trizol ls，加入氯仿，4度离心机设定。

围观的几个人眼睛都不眨一下。

他们跟着江河做了几次科研了，举手投足间已经有了一丝老实验员的沉稳。

演示结束，江河将样本放进-80度超